Z pražské metropole se můžete na Karlštejn vydat na kole.
Na Karlštejn směřuje z hlavního města několik tras. Jedna z nich začíná například u stanice metra Stodůlky a vede přes Chýnici a Mořinu s proslulými lomy Amerika. Pokud se chcete vyhnout silnicím, vyjeďte z Radotína, kde se napojíte na červenou turistickou značku vedoucí až na Karlštejn.
Podle varianty, kterou si vyberete, najedete z Prahy do Karlštejna 25 - 36 kilometrů. Trasa po silnici je středně náročná, trasa přes lesy CHKO Český kras má náročné výjezdy a dlouhé sjezdy v lesních kamenitých úvozech.